1930年，圣捷尔吉于回到匈牙利，他发现当地的一种辣椒含有大量的己糖醛酸。他最终成功地从辣椒中分离出1公斤纯的己糖醛酸，并再送一批给Haworth分析。Haworth终于确定了维生素C的正确化学结构。后来，Tillmans，Vedder，Harris等也自各种食品中提取到了维生素C。1933年，维生素C开始人工合成。

1937年，因为对维生素C和人体内氧化反应的研究，圣捷尔吉获得了诺贝尔生理学或医学奖。

维生素C为白色粉末，分子量为176.12，通常是片状，有时是针状的单斜晶体。无臭，味酸，易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚，氯仿、石油醚等有机溶剂。结构上看，维生素C与糖类十分相似，分子中有两个不对称碳原子（C4，C5），能形成四个光学异构体。

维生素C分子结构中具有连二烯醇的结构，水溶液呈酸性。将维生素C溶液用玻璃棒蘸取并滴在蓝色石蕊试纸上，可观察到试纸变红；再用玻璃棒蘸取少量维生素C滴在PH试纸上，测出pH约为3；最后向维生素C溶液滴加2滴甲基橙试液，溶液变红。

因为C-2上的羟基可与C-1的羰基形成分子内氢键，所以C-2羟基的酸性较C-3上的羟基弱。C-3上羟基的酸性较强，可与碳酸氢钠或稀氢氧化钠溶液反应，生成C-3烯醇钠盐。但在强碱如浓氢氧化钠溶液中，内酯环被破坏，生成酮酸钠盐。

维生素C分子中的连二烯醇的结构，容易释放出H原子而具有很强的还原性。在水溶液中易被空气中的氧氧化，生成去氢抗坏血酸。二者可以相互转化，故维生素C有氧化型和还原型两种形式，二者有同等的生物学活性。去氢维生素C被硝酸银、三氯化铁、碱性酒石酸铜、碘、碘酸盐及2,6-二氯靛酚等氧化，生成去氢抗坏血酸。去氢抗坏血酸在硫化氢、氢碘酸等还原剂的作用下，可逆转为维生素C。由于去氢抗坏血酸分子中的共辄系统被破坏，使得去氢抗坏血酸比维生素C更易被水解，生成2,3-二酮古洛糖酸，并可进一步氧化生成苏阿糖酸和草酸而失去活性。在水溶液中的氧化速度由pH和氧气的浓度决定，重金属离子等可催化上述反应。

维生素C在水溶液中不稳定，很快被氧化成脱氢抗坏血酸，尤其是在中性或碱性溶液中更快被氧化，遇光、热、铁和铜等金属离子均会加速氧化，能形成稳定的金属盐；维生素C为相对强的还原剂，贮存日久色变深，成不同程度的浅黄色。

维生素C的水溶液中加入硝酸银试液，产生黑色的银沉淀；若加入2,6-二氯靛酚试液作用（试液本身为青色，在酸性溶液中为红色），可使其褪色。此两反应可用于维生素C的鉴别。

维生素C结构与糖类相似，具有糖类的性质，可在三氯醋酸或盐酸存在下，经水解、脱羧、失水等反应，转变成糠醛，再与吡咯在50℃反应，生成蓝色，这个反应也可用于鉴别维生素C。

维生素C的生产方法大致可分为3类，即化学合成法、化学合成结合生物合成（发酵）法（有时也称为半合成法）和生物合成（发酵）法。近来发现的酵母发酵法合成维生素C则是唯一不需要经过中间化合物的生物合成法，虽然具有很大的吸引力，但远未达到工业生产的水平。

1933年，Reichstein和Ault两个研究小组分别发表了维生素C化学合成的方法，但由于合成路线长、收率低，并没有实现工业化生产。

从1937年起，以Reichstein和Grussner的发明为基础，建立了从葡萄糖出发，用化学法结合发酵法生产维生素C的“莱氏法”（Reichstein procedure）。从此，维生素C进入了大规模工业化生产阶段。这一方法后经不断改进和完善，在世界上得以广泛应用。莱氏法工业生产的总收率超过60%。由于葡萄糖原料便宜且易得，中间化合物尤其是双丙酮-L-山梨糖的化学性质稳定，以及工艺流程的不断改进，且产品质量好等原因，在国外“莱氏法”仍是维生素C生产的主要方法。该方法以D-山梨醇作原料，需经4大步反应，才能得到维生素C产品。

由于“莱氏法”的反应步骤多，“三废”严重，从20世纪60年代初开始，虽然有许多研究者进行了改进，缩短了“莱氏法”的反应步骤，但都没有取得实质性进展。

2-酮-L-古龙酸（2-keto-L-gulonicacid,2-KGA）是合成维生素C的直接前体，在维生素C生产中，由2-酮-L-古龙酸到维生素C的最后一步均为化学转化。从葡萄糖出发，产生2-酮-L-古龙酸的途径已知至少有6条：①D-山梨醇途径；②L-山梨糖途径（即二步发酵法）；③L-艾杜糖酸（或L-古龙酸）途径；④2-酮-D-葡萄糖酸途径；⑤2,5-二酮-D-葡萄糖酸途径；⑥直接从葡萄糖发酵产生2-酮-L-古龙酸的途径。在这6条合成途径中，只有第2条途径已实现了工业化生产，即中国自行开发的“二步发酵法”，过程如下。

D山梨醇的化学合成

山梨醇和葡萄糖都是6碳糖类化合物，而且二者的差别在于C-1基团。因此将D-葡萄糖C-1上的醛基还原成醇基，即得D-山梨醇。工业生产中，采用催化氢化D-葡萄糖，控制压力，在氢作还原剂、镍作催化剂的条件下，将醛基还原成醇羟基，从而制备D-山梨醇。将50%葡萄糖溶液在75℃下加入活性炭，除去杂质。用石灰乳液调节pH8.4，压入氢化反应器，加入镍催化剂，通入氢气，在3.43×103kPa、140℃下反应，不吸收氢气时为反应终点。反应过程严格控制pH8.0-8.5，否则葡萄糖的C-2位差向异构化产物甘露糖会被还原形成甘露醇。反应结束后，静置沉降除去催化剂，反应液经过离子交换树脂、活性炭处理后，减压浓缩、得到含量60%-70%的D-山梨醇，为无色透明或微黄色透明黏稠液体，收率在97%左右。

2-酮基-L-古龙酸的微生物发酵

采用两种微生物进行两步生物转化，制备2-酮基-L-古龙酸。首先将D山梨醇转化成L-山梨糖，再进一步转化为2-酮基-L-古龙酸。

第一步发酵：从D-山梨醇到L-山梨糖只是把C-2位的羟基氧化为默基，保持其他基团不发生变化，这个反应的特异性可通过微生物转化得以实现。虽然多种醋酸杆菌都可作为转化菌，但黑醋酸杆更好。醋酸杆菌经种子扩大培养，接入发酵罐，种子和发酵培养基主要包括山梨醇、玉米浆、泡敌、酵母膏、碳酸钙等成分，pH 5.0-5.2。山梨醇浓度控制在24%-27%，培养温度29-30℃，通气比为1∶1-0.7VVM。测定发酵液中山梨糖，当浓度不再增加时，结束发酵，约10h。D-山梨醇转化为L-山梨糖的生物转化率达98%以上。发酵液经低温60℃灭菌20min，冷却至30℃，作为第二步发酵的原料。

第二步发酵：从L-山梨糖到2-酮基-L-古龙酸需要将C-1位羟基氧化为羧基，保持其他基团不发生变化。许多微生物，包括假单胞杆菌、葡萄糖酸杆菌、醋酸杆菌、气杆菌、芽孢杆菌等能使L-山梨糖转化为2-酮基-L-古龙酸。其中醋酸杆菌、葡萄糖酸杆菌和芽孢杆菌的转化活力最强，而且，搭配使用两种混合菌，产物的收率达到最高水平。单独使用一种菌，一般产量很低。葡萄糖酸杆菌，细胞呈长或短杆状，生鞭毛或不具鞭毛，能在pH4.5时生长，可氧化葡萄糖生成葡萄糖酸并具有多元醇生酮作用。最适生长温度30-35℃（弱氧化葡萄糖酸杆菌）或18-21℃（氧化葡萄糖酸杆菌）。工业生产中，采用氧化葡萄糖酸杆菌（Gluconobacter orydans，俗称小菌）和巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium，俗称大菌）混合培养。前者为产酸菌，后者为搭配菌。可能的机理是前者把L-山梨糖转化为L-艾杜糖（把C-1位羟基氧化为醛基），后者进一步转化为2-酮基-L-古龙酸（把C-1位醛基氧化为羧基）。

生产维生素C的发酵罐均在100m3以上，瘦长型的气升式反应器，无机械搅拌。种子和发酵培养基的成分类似，主要有L-山梨糖、玉米浆、尿素、碳酸钙、磷酸二氢钾等，pH值为7.0。大、小菌经二级种子扩大培养，接入含有第-一步发酵液的发酵罐中，29-30℃下通入大量无菌空气，培养72h左右结束发酵，残糖0.5%以下。由L-山梨糖生成2-酮基-L-古龙酸的转化率可达70%～85%。

发酵前期是菌体生长期，应该供氧充足，处于高溶解氧状态，促进生长，缩短前期。发酵中期是主要产酸期，产酸率和耗糖率为常数，溶解氧浓度应该控制在适宜的范围内，一般20%即可。发酵后期菌体活力下降，生产能力减慢，根据产酸浓度和残糖及时结束发酵。

在整个发酵期间，保持一定数量的氧化葡萄糖酸杆菌是发酵的关键。可根据芽孢的形成时间来控制发酵。当伴生的芽孢杆菌开始形成芽孢时，产酸菌株开始产生2-酮基-L-古龙酸，直到完全形成芽孢后和出现游离芽孢时，产酸量达高峰。滴加碱液调pH值，使保持7.0左右。当温度略高（31-33℃）、pH在7.2左右、残糖量0.8mg/mL以下，即为发酵终点。此时游离芽孢及残存芽孢杆菌菌体已逐步自溶成碎片，用显微镜观察已无法区分两种细菌细胞的差别，整个产酸反应到此也就结束了。

2-酮基-L-古龙酸的分离纯化

经两步发酵后，发酵液中仅含8%左右的2-酮基-L-古龙酸，且残留菌丝体、蛋白质和悬浮的固体颗粒等杂质，常采用加热沉淀、化学凝聚、超滤分离提纯。传统工艺是加热沉淀，发酵液经静沉降后，用盐酸调节pH至蛋白质等电点，并加热使蛋白质凝固，然后用高速离心机分离出菌丝、蛋白和微粒。

酸化上清液通过732氢型离子交换树脂柱，控制流出液的pH值。当流出液达到一定pH值时，则更换树脂进行交换。收集流出液和洗脱液，在加热罐内调节pH至等电点，加热70℃，加入活性炭，升温90-95℃维持10-15min，快速冷却，过滤。

滤液再次通过阳离子交换柱，控制流出液pH1.5-1.7，酸化为2-酮基-L-古龙酸的水溶液。在45℃下减压浓缩，冷却结晶，离心分离，冰乙醇洗涤，得到2-酮基-L-古龙酸，提取率80%以上。

维生素C的制备

2-酮基-L-古龙酸的C-4位内酯化、C-2位烯醇化后才能得到维生素C，在酸或碱催化剂作用下实现。工业生产中常采用碱转化法催化⒉-酮基-L-古龙酸生成维生素C。

用扭力天平准确称取新鲜样品（含丰富维生素C的果蔬等）10g，置乳钵中加入少量2%HCl（5-10ml）。充分研磨提取（勿戳出溶液），如此研磨提取3-4次，n次提取液通过两层纱布经漏斗滤入50ml的容量瓶中（勿使提取液由纱布滴在瓶外）。最后用2%HCl 稀释至刻度并混匀，得到维生素C粗溶液。维生素C在pH值3-4的酸性条件下提取稳定性最佳。单一酸提取剂2%草酸应用最多，5%三氯乙酸和10%盐酸提取效果较好，偏磷酸的效果好于草酸，但偏磷酸成本较高且有剧毒，不推荐使用。混合酸溶剂提取效果优于单一酸提取剂提取效果，报道文献大多采用2%草酸混合酸，提取效果更加稳定高效。

维生素C的大部分生物学功能由其独特的结构决定。维生素C分子式为C6H8O6，内酯环结构上存在两个活跃的羟基，极易发生电离（pKa分别为11.6、4.2），生成ASC和DHA，而DHA可在一系列酶促反应中被还原为ASC。因此，ASC成为了天然抗氧化剂，上述反应中还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）依赖DHA还原酶介导的反应最具有代表性。

线粒体氧化磷酸化过程及细菌、病毒诱导炎症反应过程中均可产生大量活性氧自由基。许多蛋白质和酶需要巯基（-SH）才能够发挥生理功能，但巯基易受到氧化自由基的氧化，若无法尽快清除活性氧自由基即能发生DNA氧化、脂质过氧化反应、氨基酸氧化等。保护红细胞膜上的巯基可防止溶血、保护血红蛋白防止其氧化成高铁血红蛋白等。另外，维生素C能够与维生素E协同作用，及时清除疏水区间氧化自由基；通过还原反应介导电子转移，还能够有效维持氧化还原环境的平衡，对维持细胞完整性及细胞正常的生理活动非常重要。

胶原蛋白（collagen）主要存在于皮肤、骨骼、内脏等各部位，可维持皮肤及其他器官的形态。为促进胶原蛋白分子交联、保证组织结构的完整，需要胶原蛋白脯氨酸-4-羟化酶（collagen-4-hydroxylase,C-P4H）。C-P4H是亚铁离子和2-氧戊二酸盐依赖型双加氧酶，催化胶原蛋白脯氨酸残基发生羟基化反应，生成(2S,4S)-4-羟脯氨酸。而维生素C正是C-P4H发挥酶活性的辅助因子。

除了C-P4H，如此家族中多巴胺β-羟化酶（dopamine beta-hydroxylase,D-βH）可催化多巴胺生成去甲肾上腺素，γ-丁内胺双加氧酶（γ-butyrobetaine dioxygenase,GBBH）可催化肉毒碱合成，肽酰甘氨酸加氧酶（peptidylglycineα-hydroxylating monooxygenase,PHM）可催化部分激素前体蛋的酰胺化反应等。一旦缺乏维生素C，大量的Fe2+被氧化为Fe3+，C-P4H很快失去酶活性，严重影响胶原蛋白上脯氨酸残基羟基化，引发维生素C缺乏病。特定部位毛细血管破损无法及时修复，引发瘀血、伤口愈合延迟、关节痛、紫癜等，严重者可引起死亡。若重新添加维生素C，大量Fe3+被还原成Fe2+，C-P4H酶活性可完全恢复。此外，维生素C还可促进Fe3+向Fe2+转化，还能够增加机体对铁元素的吸收，促进细胞内铁蛋白表达。

维生素C能够通过对5-甲基嘧啶修饰酶1,Jumonji C结构域的组蛋白去甲基化酶的调节，参与对染色质结构的重塑和对效应基因表达的调控。维生素C能够通过增强HIF-PHs的活性，诱导HIF-2α降解，促进前体i PSCs成熟，抑制重编程过程中p53基因的表达。维生素C还能够调控蛋白ALKBHs,ALKBHs不仅能够除去组蛋白H2A上的甲基化修饰，还可与核心多能因子相互作用，共同调控胚胎干细胞特异性mi RNA的表达。上述反应不仅能够延缓细胞的衰老和凋亡，还可对部分组织的修复起到促进作用。

20世纪70年代起，人们开始维生素C抗肿瘤抗癌症方面的研究。经过多次临床试验及动物试验，逐步揭开维生素C抗癌、抗肿瘤的秘密。

基因组异常高甲基化是引发细胞癌变的重要原因，DNA基因启动区Cp G岛中的高甲基化可抑制抑癌基因的表达。大部分成因是DNA甲基转移酶（DNA methyltransferases,DNMTs）功能亢进和TET家族蛋白的功能缺失，而维生素C能够提升TET家族中绝大部分酶活性，相应减少甚至避免了DNA高甲基化，促进抑制肿瘤基因的表达，促进干细胞分化，增强DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase inhibitor, DNMTi）诱导的免疫信息。

HIF-1α是转录因子，癌症细胞中HIF-1α会表现出更高的表达水平，可调控数百个恶性肿瘤相关的基因转录，通过上调细胞糖酵解、红细胞生成、细胞存活通路、血管生成及组织重塑等使细胞适应快速生长而引起的缺氧及代谢应激，其中包括决定肿瘤血管生成的血管内皮生长因子。维生素C不仅能够调控HIF-1α羟基化修饰，还可作为Fe2+/α-KGDDs的辅助因子增强HIF羟化酶的功能，抑制HIF-1α的转录并阻断其下游通路，促进其蛋白降解。

在维生素C不同活性形式相互转化过程中，当脱氢抗坏血酸浓度达到100nmol/L以上时，即可生成H2O2；H2O2进入细胞内部，首先可造成DNA损伤，为修复损伤会消耗大量能量（ATP）。肿瘤细胞能够表现出特有的瓦博各效应（Warburg effect），即糖酵解反应活跃，葡萄糖消耗量大，乳酸含量高，能量代产生效率低。维生素C进入肿瘤细胞内可迅速还原为维生素C原型，进一步升高ROS水平，产生类似H2O2的影响，导致细胞能量耗竭，线粒体损伤，进而使细胞凋亡。有研究表明，维生素C对正常细胞的杀伤作用（EC50）大于20mmol/L，而对癌症细胞的EC50小于4mmol/L。

人们对维生素C的传统研究领域集中于其氧化还原性及辅助因子辅酶，而作为调控细胞信号通路因子的相关研究是近二十年来新兴和活跃的领域。

有研究发现，维生素C能够通过降低ROS的水平抑制P38MAPK的活性，抑制P53引发的细胞衰老，还能够通过激活ERK信号通路，促进损伤组织内皮细胞的再生及成熟。维生素C可通过抑制NFkβ的信号激活参与炎症发生、肿瘤形成、细胞凋亡等生物学过程。有研究表明，维生素C可通过激活MEK-ERK1/2通路促进心肌细胞的增殖，能够通过抑制部分腺苷酸环化酶降低细胞中c AMP的积累，抑制前体脂肪细胞的成熟和分化。

胆固醇不仅可作为细胞膜及血浆脂蛋白的重要组分，还是许多重要物质的前体，如胆汁酸、肾上腺皮质激素、维生素D、性激素等。胆固醇代谢过程中，维生素C是胆固醇环状部分羟化的辅酶，侧链分解即成为胆汁酸。因此，维生素C能够双向调节胆固醇的代谢与合成。

维生素C可用作测定砷、铁、碘、铋、钙、镁、钛、钨、锑、磷的试剂，还可作为酸酐测定的基准物质。还可用作还原剂、掩蔽剂、色谱分析试剂。

1.坏血病、传染性疾病及紫癜、克山病患者发生心源性休克时。2.慢性铁中毒。3.特发性高铁血红蛋白血症。4.维生素C的需要量增加：患者接受慢性血液透析、胃肠道疾病、艾滋病、结核病、癌症、溃疡病、甲状腺功能亢进、发热、感染、创伤、烧伤、手术后等；因严格控制或选择饮食、接受肠外营养的患者、营养不良、体重骤降以及妊娠期和哺乳期妇女；应用巴比妥类、四环素类、水杨酸类,或以维生素C作为泌尿系统酸化药时。

维生素C在医药中有维生素C片、维生素C注射液、维生素C颗粒、维生素C泡腾片、维生素C泡腾颗粒、复方维生素C钠咀嚼片几种制剂应用。

除非特别排除，否则在农药化学制剂（包括抗微生物农药化学制剂）中使用维生素C作为惰性或活性成分所产生的残留物，如果其使用符合良好的农业或制造惯例，则可免于遵守《FFDCA》第408节中的耐受性要求。

维生素C可燃，但无明火。粉尘在空气中形成易爆混合物，爆炸严重程度适中。

过量使用维生素C，有以下健康危害：

生长期儿童大于3g/日，数月后会影响骨质对钙磷吸收，成年后易患骨病。

成人大于3g/日，则尿中排出量增加，因维生素C与葡萄糖在还原方面反应是相同的，故因其还原性可产生尿糖的阳性反应，这就有碍于糖尿病患者的治疗和确切尿液变为弱酸性；约10天后，可发生尿路草酸钙结石和肾结石，严重者并发尿频、尿急并产生血尿。

4-5g/日静注时，可产生严重溶血反应。因为维生素C使红细胞溶解的敏感性增加。5g/日可使铁的吸收增加，维生素C可使肠内不易吸收的Fe3+还原成易吸收的Fe2+，进而形成高铁红细胞性贫血，且可减少肠道对B12的吸收，使巨幼红细胞性贫血的病情恶化加速。

治疗中大于3-4g/日，则可出现对抗肝素和双香豆素的抗凝作用，导致血栓形成。

女性大于5g/日可降低生育能力。因为大量使用维生素C可引起子宫颈黏液中糖蛋白二硫键改变，阻止精子穿透，造成不育。孕妇以3g/日连用几个月过后，其胎儿出生后如不给予同样大剂量的维生素C，胎儿便可发生坏血病。人工流产后的妇女给予2g/日，可致月经性出血。

大量使用维生素C大于60天，体内含量反而下降，因为改变了体内对维生素C的调节机制，加速了分解和排泄。所以一旦停药后，体内仍保持维生素C的加速分解和排泄，导致数日或数月的维生素C缺乏症，出现早期坏血症状，如齿龈肿胀及出血、牙龈松动等。

含中量维生素B12的膳食中加0.1g维生素C，维生素B12被破坏40%，若加入0.5g，则破坏95%。因为维生素B12的化学结构在酸性条件下易被破坏而失败。维生素B12大量破坏后, 则人体易患贫血。

人体内有炎症时，每天大量使用维生素C，可降低人体抵抗力，不利于炎症吸收。因为白细胞周围的维生素C过多，不仅妨碍白细胞摧毁病菌，而且还会使病菌和癌细胞得到保护。所以正在接受放化疗的癌症病人不宜大量使用维生素C。

滥用维生素C可能会加快动脉硬化。

维生素C在空气和碱性介质中迅速氧化，故应用棕色玻璃瓶密封包装，于阴凉、干燥处避光保存，需要与强氧化剂和强碱分开存放。

运输维生素C时应防止粉尘扩散，可使用局部排气或呼吸保护装置，防护手套，戴安全眼镜。运输时避免直接接触光线以及空气。

过期或废弃维生素C不宜通过将药物冲入马桶或丢弃到垃圾桶中进行处理。如果可能，将药品退还给制造商进行适当处置，小心正确标记并安全地包装材料。或者，废弃维生素C应由医疗废物承包商贴上标签、安全包装和运输，以掩埋方式在获得许可的危险或有毒废物填埋场或焚烧炉中处置。

维生素C可在酸性溶液中以淀粉为指示剂，用碘滴定液直接滴定。

测定方法：取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30s内不褪色。每1ml的碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的维生素C。

操作中应注意：滴定反应在酸性溶液（醋酸、硫酸或偏磷酸）中进行，可使维生素C受空气中氧的氧化速度减慢；加新沸过的冷水溶解，是为了减少水中溶解氧的影响。即使如此，当供试品溶于稀酸后仍需立即滴定，以减少空气中氧的干扰。

本法适用于维生素C原料药的测定。几乎所有的国家药典均以此法进行原料药的含量测定。由于制剂中常有还原性物质存在，对此法有干扰，故一般不用此法进行制剂中维生素C的测定，但考虑到该法极简便、快速,《中国药典》（2020年版）仍用此法进行片剂和注射剂的含量测定。不过为了消除干扰，测定前要先做一些必要的处理。如片剂溶解后应过滤，弃去初滤液，取续滤液测定；注射剂中常含有作为抗氧剂的亚硫酸氢钠，在滴定前应加入丙酮（或甲醛）使之与亚硫酸氢钠反应生成加成物而掩蔽起来，以消除干扰。

2,6-二氯靛酚是一种氧化–还原型指示剂染料，利用维生素C的强还原性，可使其从氧化型（在酸性溶液中）的红色还原为还原型无色酚亚胺，从而使颜色发生显著变化，用作维生素C的容量分析或比色测定。

维生素C在酸性溶液中用2,6-二氯靛酚滴定时，滴定至溶液显玫瑰红色时，即为终点，无需另加指示剂。

精密量取本品适量（约相当于维生素C 50mg），置100ml量瓶中，加偏磷酸–醋酸试液20ml，用水稀释至刻度，摇匀；精密量取稀释液适量（约相当于维生素C 2mg），置50ml的锥形瓶中，加偏磷酸–醋酸试液5ml，用二氯靛酚滴定液滴定至溶液显玫瑰红色，并持续5s不褪；另取偏磷酸-醋酸试液5.5ml，加水15ml，用二氯靛酚滴定液滴定，作为空白试验校正。以二氯靛酚滴定液对维生素C滴定度计算，即可。

本法的专属性较碘量法高，多用于维生素C的制剂及食品分析。但本法非为维生素C的专一反应，其他还原物质，如维生素B、亚铁化合物、烟酸还原态的衍生物、含羟基的化合物等，均有干扰，只是由于维生素C的氧化速度远较干扰物质氧化速度快，故快速滴定可减少干扰物质的影响。因此应该快速滴定，国际药典规定滴定应在2min内完成。

片剂的含量测定首先用偏磷酸–醋酸试液（也有用偏磷酸试液的）反复提取，合并提取液，滤过，残渣用偏磷酸–醋酸试液洗涤，洗液与滤液合并，再进行含量测定，这是为了使维生素C在提取过程中保持稳定，并且把维生素C全部抽提出来，保证测定结果准确可靠。

由于准2,6-二氯靛酚液不够稳定，贮存时易缓缓分解，故需临用前配制并标定。

N-溴琥珀酰亚胺具弱氧化性，而维生素C为强还原剂，当有其他还原剂干扰时，N-溴琥珀酰亚胺有选择性，首先按定量氧化维生素C。

滴定溶液中加碘化钾和淀粉作指示剂,当维生素C完全被氧化后，微过量的N-溴琥珀酰亚胺氧化碘化钾析出游离碘，与淀粉显蓝色而指示终点。

本法可用于制剂、生物体液、蔬菜水果中维生素C的测定，具有迅速、准确、专属性高的优点。但当供试液中有亚硫酸盐、硫代硫酸盐和硫脲等时，由于它们可在碘化钾被氧化之前被氧化,故对测定有干扰。

与1,10-菲洛啉–铁(Ⅲ)[1，10 - phenanthroline - iron(Ⅲ)]试剂显色。在酸性溶液中铁(Ⅲ)氧化维生素C生成去氢维生素C的同时被还原为亚铁(Ⅱ)离子，后者可与1,10-菲洛啉络合生成红色的亚铁菲绕啉离子，在波长51 0nm处有最大吸收。

本法可用于维生素C及其制剂的含量测定。本法的显色速度快，在室温下只需1-2min即可达最深的颜色。最佳pH范围为1.5-6.5，最后比色溶液的pH值约为5.5，所以供试品液不必再调节pH值。显色后颜色可稳定24h不变化，显色试液也可稳定数周不变化。

经试验表明，10倍量的下列化合物对测定无干扰：烟酸、烟酰胺、脲、硫脲、甲硫氨酸、淀粉、葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、麦芽糖、门冬氨酸、酒石酸、谷氨酸、枸橼酸以及钙、镁和铜盐等。含有维生素A、维生素D1、维生素B1，维生素B2、维生素B6，以及烟酰胺和泛酸钙等的复合维生素制剂对维生素C的测定均无干扰。上述许多化合物特别是还原性化合物对此测定无干扰的原因是由于本测定在室温进行、条件缓和、反应时间极短。

维生素C在pH5-10之间在267nm波长处有最大吸收，其摩尔吸收系数为1.5×10'，设这时吸光度为A(I)，如果维生素C经Cu*催化氧化生成去氢维生素C，进一步水解为二酮古洛糖酸，那么该氧化产物在相同条件下测吸光度A(Ⅱ) ,其摩尔吸收系数很小，应用这个性质，可以通过测定维生素C在Cu催化氧化前后吸光度之差，来测定维生素C的含量。

体液中维生素C浓度的测定通常采用2,4-二硝基苯肼比色法和高效液相色谱法。

国家标准《食品添加剂 维生素C（抗坏血酸）》（GB 14754-2010）实施于2010年03月21日，适用于以D-葡萄糖或山梨醇为起始原料经发酵后化学合成制得的食用添加剂维生素C。

国家标准《化学试剂 L(+)-抗坏血酸》实施于2015年12月1日，规定了化学试剂L(＋)-抗坏血酸（维生素C）的性状,规格、试验,检验规则和包装、贮存、运输及标志。本标准适用于化学试剂L(＋)-抗坏血酸（维生素C）的检验。

国家标准《饲料添加剂 L-抗坏血酸（维生素C）》（GB 7303-2018）实施于2020年1月1日，规定了饲料添加剂L-抗坏血酸（维生素C）产品的要求、试验方法、检验规则及标签，适用于以D-山梨醇为原料发酵后再经化学合成制得的维生素C。

维生素C钠又称L-抗坏血酸钠，有晶体和颗粒两种。维生素C钠主要用作营养增补剂、抗氧剂，其作用与维生素C相同。由于无酸味且易溶于水，故广泛用于火腿、香肠、蛋糕的保鲜固色和月饼等的防霉。其合成路线有两条：一条是在维生素C水溶液中加入硫酸氢钠，放置片刻后加入乙醇沉淀、过滤、干燥；另一条路线是将维生素C溶于有机溶剂中，加入碳酸氢钠，然后加热、反应、冷却、析出、过滤。

维生素C钙也称L-抗坏血酸钙，维生素C钙在国际市场上的价格比维生素C高15%—30%。维生素C钙主要用作食品抗氧剂，其添加到食品中不改变原食品味道，能增补食品中易被吸收的钙，同时又不失去维生素C的生理活性，是防治佝偻病和坏血病的双功能助剂。其合成方法是先将维生素C溶于水中，于剧烈搅拌下加入碳酸钙，所得反应物在室温下自行结晶，可得纯度为98%的结晶产品二水合维生素C钙。其合成工艺简单，易于生产。

维生素C磷酸酯镁是一种无嗅、无味的粉末，进入人体后迅速酶解成维生素C，其优点是不易氧化，不怕碱，不受铁等金属离子影响，能长期储存。其生产工艺主要是维生素C或维生素C钠盐在一定条件下与POCl3反应生成维生素C磷酸酯或维生素C磷酸酯钠，再与氧化镁反应生成维生素C磷酸酯镁。

由于动物消化器官中存在磷酸酯酶，能水解维生素C磷酸酯，使维生素C游离出来，因而可供动物利用。其优点是在水中长时间保持稳定，同时经一定压力处置仍具有抗氧化作用，这一特点使它在受压加工成所需的小丸状饲料的过程中仍保持性能稳定。实验证明，与普通维生素C相比，维生素C多磷酸酯质量稳定，性能优良，其抗氧化性、浸水稳定性、热稳定性、耐热力和抗紫外线能力均大大提高，在对虾和淡水鱼中应用效果明显，值得在饲料工业中推广应用。其合成所用原料主要有维生素C、三偏磷酸钠及有关反应助剂。

维生素C棕榈酸酯分子式为C22H38O7，是一种高效、安全、无毒、脂溶性的抗氧剂，多用于婴儿食品、罐头、奶油等，可添加到药物软膏及胶囊制剂中以增加药物稳定性。其价格几乎是维生素C的4倍，利润很高。近两年这个品种在国内已引起了人们的重视，其合成的主要原料为棕榈酸、维生素C、二氯亚砜。

维生素C硬脂酸酯本品又称L-抗坏血酸硬脂酸酯，分子式为C24H42O7。该品为略带光泽的白色结晶性粉末，干燥状态下基本稳定，吸湿状态下极易氧化，不溶于水，溶于花生油、棉子油中。该产品是具维生素C效力的亲油性物质，可作食品营养增补剂。该产品的生产工艺是将维生素C与硬脂酸溶于95%的H2SO4中，放置24h，加碎冰使之析出后用乙醚等有机溶剂萃取，用水洗至中性，然后回收有机溶剂使产品析出，再用石油醚、乙醚等有机溶剂进行重结晶后真空干燥即得。

维生素C-葡萄糖化合物其被称为“稳定维生素C”的新产品。除可用于传统的维生素C用途外，还可望开发注射剂、点滴药、点眼药等新的用途。其生产方法是利用来自微生物的环状麦芽糖糊—葡糖转移酶的糖转移反应。所生成的产物十分稳定，可溶于水，有酸味，呈粉状，能与多种金属成盐，与原来的维生素C比较性能没有变化。