同步培养

更新时间:2022-08-25 12:01

同步培养是一种细胞培养方法,它能使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。同步培养方法可使群体细胞处于同一生长阶段,并同时进行分裂的生长。

简介

微生物个体生长是微生物群体生长的基础。但群体中每个个体可能分别是处于个体生长的不同阶段,因而它们的生长、生理与代谢活性等特性不一致,出现生长与分裂不同步的现象。同步培养(synchronous culture)是一种培养方法,它能使群体中不同步的细胞转变成能同时进行生长或分裂的群体细胞。以同步培养方法使群体细胞能处于同一生长阶段,并同时进行分裂的生长方式称为同步生长。通过同步培养方法获得的细胞被称为同步细胞或同步培养物。同步培养物常被用来研究在单个细胞上难以研究的生理与遗传特性和作为工业发酵的种子,它是一种理想的材料。

用一般培养方法获得的细胞通常是不完全同步的细胞,就是同步培养方法获得的同步细胞经几次传代之后,也会比现不同步的现象。如何使不同步转变为同步,以及如何使用同步细胞能较长时间地保持同步,这是同步培养中要研究的课题。

培养方法

机械方法

这是一类根据微生物细胞在不同生长阶段的细胞体积与质量或根据它们同某种材料结合能力不同的原理设计出来的方法。其中常用的有:

1.离心方法

将不同步的细胞培养物悬浮在不被这种细菌利用的糖或葡聚糖的不同梯度溶液里,通过密度梯度离心将不同细胞分布成不同的细胞带,每一细胞带的细胞大致是处于同一生长期的细胞。分别将它们取出进行培养,就可以获得同步细胞。

2.过滤分离法

将不同步的细胞培养物通过孔径大小不同微孔滤器,从而将大小不同的细胞分开,分别将滤液中的细胞取出进行培养,获得同步细胞。

3.硝酸纤维素滤膜法

根据细菌能紧密结合到硝酸纤维素滤膜上的特点,将细菌悬液通过垫有硝酸纤维素滤膜的过滤器,然后将滤膜颠倒过来,再将培养基流过滤器,以洗去未结合的细菌,然后将滤器放入适宜条件下培养一段时间,其后仍将培养基流过滤器,这时新分裂产生的细菌被洗下,分部收集并通过培养获得同步细胞。

环境条件控制技术

这类技术是根据细菌生长与分裂对环境因子要求不同的原理设计的一类获得同步细胞的方法。

1.温度

最适生长温度有利于细菌生长与分裂,不适宜温度如低温不利于细菌生长与分裂。通过适宜与不适宜温度的交替处理之后,通过培养可获得同步细胞。

2.培养基成分控制

培养基中的碳、氮源或生长因子不足,可导致细菌缓慢生长直至生长停止。因此将不同步的细菌在营养不足的条件下培养一段时间,然后转移到营养丰富的培养基里培养,能获得同步细胞,另外也可以将不同步的细胞转接到含有一定浓度的,能抑制蛋白质等生物大分子合成的化学物质如抗生素等的培养基里,培养一段时间后,再转接到完全培养基里培养也能获得同步细胞。

3.其他

对于光合细菌可以将不同步的细菌经光照培养后再转到黑暗中培养,这样通过光照和黑暗交替培养的方式可获得同步细胞;对于不同步的芽孢杆菌培养至绝大部分芽孢形成,然后经加热处理,杀死营养细胞,最后转接到新的培养基里,经培养可获得同步细胞。

环境条件控制获得同步细胞的机理不完全了解。这种处理可能是导致胞内某些物质合成,它合成和积累可导致细胞分裂,从而获得同步细胞。

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