夜行性，是一种动物行为，形容这些生物会于日间休息，却在晚间活跃，正好与我们所熟悉的日行性行为相反。也有介乎两者之间，于黄昏时期出没的生活习性。昼伏夜出的习性是一种生态位分化的表现，不过并不以资源的多寡来决定，而是根据时间本身。另外夜行性也可看成是一种避敌行为，避过有较多猎食者活跃的时间，从而减少被捕猎的机会。避开日间猛烈的阳光也可以是生物选择夜行性的一大因素，特别是在沙漠生活的生物，就会为了减少散失身体的水份而选择于晚间活动。夜行性也有助生物适应较好的渗透调节[1]。

不少物种一般于日间活动，但在特别的季节或活动时则展现出夜行性。例如不少海鸟及海龟会在繁殖季节时，于晚间到达繁殖场所，以减少它们及子女们被捕猎的机会。

夜行性动动常展现出发达的听觉及嗅觉系统，并有特别用以适应晚间活动时，低光环境下的特别视觉系统。一些动物如猫等，拥有同时适应日间或晚间活动光照度差异大的眼睛，因此日间与晚间时间均可活动；但婴猴科或蝙蝠等则受限于视觉系统而只能于晚间活动。