1997年至1999年，在江苏电视台二台担任记者、编导。1999年起，在江苏广播电视总台城市频道担任制片人、主持人。

2001年第九届全国运动会期间，孟非组织实施了江苏电视史上第一次跨省搭建演播室，卫星直播大型综合性运动会，受到江苏省委省政府领导的表扬。

2002年主持新闻直播节目《零距离》，为该栏目成为江苏地区收视率最高的电视新闻节目作出了贡献，其独立撰稿的评论专栏“孟非读报”成为《零距离》中收视率最高的子栏目。2007年至2009年主持江苏卫视《绝对唱响》、《名师高徒》。

2010年起主持《非诚勿扰》，节目受到观众的欢迎，2010年位居全国同时段综艺节目收视率榜首。2010年12月31日，参与主持《江苏卫视跨年演唱会》，并在节目中全球首唱《非诚勿扰》主题曲《往前一步》。

2011年，前往哈佛商学院学习。2011年1月7日主持2010年度百度沸点。2012年，担任河海大学播音主持专业特聘兼职教授；3月受邀主持江苏省海门中学百年校庆盛典。

2014年11月29日，孟非的“孟非的小面”面馆正式开业。2015年7月，被聘任为中国电视艺术家协会主持人专业委员会副主任。2016年1月，主持东方卫视社交服务爆笑减压节目《四大名助》。

2018年，继续主持江苏卫视相亲交友节目《非诚勿扰》。2019年4月，主持的第一季《新相亲大会》收官。

2021年7月29日，哔哩哔哩出品的首档异性交友节目《90婚介所》官宣，孟非担任主持人；；10月31日，在由抖音、江苏卫视、灿星联合出品的全民才艺真人秀节目《点赞！达人秀》担任“观察团”成员；11月9日，参与录制的腾讯视频职场观察类综艺《令人心动的offer第三季》播出。

2022年6月12日，担任山东卫视节目《迟到的恋人》第二期爱情重启观察员。

2023年9月22日，参加的江苏卫视综艺节目《非来不可》播出。

2024年4月20日，参加的江苏卫视综艺节目《非诚勿扰·臻爱季》播出。

2024年4月24日，担任电视剧《老爸去相亲》联合出品人。9月6日，加盟的《非来不可第二季》播出。

政协江苏省第十三届委员会委员。

孟非的妻子是孟非的中学同学，两人于1993年结婚，1997年孟非的女儿孟星亚出生。

2020年8月20日，孟非在社交平台发文自曝自己在医院动了手术。

2021年7月，孟非为河南暴雨灾情捐款100万元。

当地时间2024年8月24日，《我在岛屿读书第三季》节目嘉宾作家孟非作为代表在《我在岛屿读书3》中希文学交流会活动中，向中华人民共和国驻希腊共和国大使馆图书馆赠送图书。

孟非是一位天才主持人（乐嘉评）。他以主持民生新闻的历练和主持娱乐选秀的经验，为《非诚勿扰》设定出既有悬念又不矫情、既多姿多采又风格清新的尺度感，可模仿，难超越。他能让嘉宾说真话、演自己；也能与点评人相得益彰，并让后者也精彩纷呈。他不装，以人心自度，为男女指点迷津，亦让节目更具温度；他幽默节制，以人性为本，为时代传输正能量，亦让观众保持新鲜感。在这个众声喧哗、娱乐至死的年代，他永远以理性之姿面对复杂中国、以善良之心面对个体（《新周刊》评）。

2014年4月23日，有网友爆料江苏卫视《非诚勿扰》剧组集体辞职，“首批获准离职的包括主持人孟非、幕后主创王刚等26人，传投奔灿星。”对此消息，江苏卫视总编室宣传人员刘小姐表示“从没听说过孟非等人要离职”，“不可能投奔灿星”。随后，灿星娱乐宣传总监陆伟表示：自己作为灿星的一员，从未和《非诚勿扰》节目组或孟非接触过，也从未听说过此消息。而另据江苏卫视工作人员透露，的确有人士变动，但具体情况不得而知。

2015年1月23日晚，孟非突然发微博写道：“恋人分手最好是两不相欠并常记对方的好”“职场也一样，我若辞职，肯定不欠江苏卫视的。”不过很快这一消息得到江苏卫视方面否认，江苏卫视知情人士透露，孟非是因为很多分手事件心生感慨，并未有离职，此消息不属实，纯属误读。