天文五年（1536年），今川氏的家督，今川氏辉去世，遗言说要让同母弟梅岳承芳（今川义元）还俗继承家督，但引来异母弟玄广惠探的不满，因此发生争夺家督之位的花仓之乱。

内乱平定后，武田信虎为了拉拢今川氏，将长女定惠院嫁给还俗的义元，也因此甲骏同盟成立。定惠院嫁给义元后的第二年，生下嫡男氏真，而定惠院另外和义元生下岭松院殿（武田义信室）、隆福院殿两女。天文十年（1541年），父亲信虎被弟弟信玄放逐到骏府。定惠院在骏河今川馆接见信虎，这也使得定惠院的心病加重。

信虎被放逐的九年后，天文十九年（1550年），定惠院在父亲信虎的注视下离开人世，享年三十四岁。天文二十三年（1554年），定惠院死后四年，今川氏、武田氏、北条氏签订三国同盟。不过讽刺的是，三国同盟失败后，反而加速今川氏的灭亡。