寡糖链

更新时间:2023-11-04 12:34

糖链作为撮合蛋白质的辅基,一般都少于15个单糖,因此也称为寡糖链(oligosaccharide chain)或称聚糖(glycan)。

生物学功能

寡糖链对糖蛋白的抗原性生物活性、溶解性、热稳定性和抗蛋白水解酶的能力均有很大影响,其让我们分出了A、B、AB、O血型 细胞外基质糖蛋白,含水丰富,润滑,细胞附着。 细胞膜上的糖蛋白可以起到抗原的作用 识别,如MHC抗原、柱头与花粉。

细胞中的表现

在细胞组织结构中,寡糖是一种附着于细胞蛋白之上又植根于蛋白之间的细胞结构组织,它分布于细胞膜上,在细胞生命中的作用是传导信息,因为其复杂的结构随着环境的变化而改变,所以,其功能非常类似于人体的神经组织。这些寡糖链还参与细胞之间的粘附,作为病原菌及毒素的受体和激素、酶抗体和凝集素等的受体。

科学家们发现,“寡糖链”也是细胞有机物的重要组成成分,并且认为:“寡糖链”对于人体的影响比糖、蛋白、脂肪和核苷酸更重大。

寡糖链制备

糖基化是蛋白质翻译后修饰之一,在细胞生命活动的调控中发挥着重要的作用。糖基化过程中合成不同类型的寡糖链与蛋白质骨架连接。通过与糖结合蛋白之间的相互作用来实现其生物学功能,糖链结构与功能之间关系的研究需要获取大量的结构明确、结构多样的糖链单体。

目前,N–糖链的释放方法主要有酶解法和化学法;酶解法主要是利用高度特异性的糖苷酶或蛋白水解酶Pronase E结合糖基天冬酰胺酶(GA酶)来进行酶切,从而获得游离糖链。N–糖链的制备时多采用化学法。

目前存在的化学法如肼解法毒性大、通用性低、有副产物生成,只能非还原性释放出部分完整N–糖链,不适合应用于糖链的大规模制备。

研究建立一种简单快速、成本低廉的N–糖链解离的新方法,用于其大规模制备,对得到的糖链衍生化后,用于二维高效液相色谱(2D–HPLC)的分离,从而获得N–糖链单体。

研究结果如下:1.建立了一种释放N–糖链的新方法,将糖蛋白溶解于浓氨水中,在密闭容器中60℃水浴反应16小时,然后经过C18和石墨碳柱纯化,得到还原性N–糖链。现已将此法应用于RNase B、鸡白蛋白、胎牛血清蛋白、花生蛋白、银杏种子蛋白、大豆蛋白及鸡蛋清等生物样品。2.基于此方法进行了还原性N–糖链的规模化制备,扩大了反应体系,利用酸沉淀去除大量蛋白,并以自制C18和石墨碳柱对N–糖链进行纯化。目前制备的鸡白蛋白、胎牛血清蛋白、大豆蛋白及鸡蛋清中的N–糖链均已达到克级。3.取鸡白蛋白及大豆蛋白中制备所得还原性N–糖链混合物标记苯磺酰肼(BSH)后,利用亲水色谱柱进行一维HPLC初步分离后脱标记,得到不同的还原性N–糖链组分。不同组分的还原性N–糖链可根据需要偶联不同的标记试剂,并结合2D–HPLC分离获得高纯度的N–糖链衍生物单体用于多方面的研究。

技术突破

寡糖链定性定量分析

在我国将生物质谱技术引入糖类物质分析研究,建立了系统的糖蛋白–寡糖链释放、富集纯化及定性定量分析鉴定的新方法及新技术体系,实现了N/O–寡糖链非还原性释放和同分异构体水平的高灵敏度分析鉴定。开展了多糖可控性降解及其活性寡糖片段的分离制备和结构鉴定。发展了还原性糖链柱前衍生化HPLC及MS分析技术、多糖及寡糖(链)的荧光标记和活细胞荧光成像方法。此研究为进一步构建完善的功能寡糖库,阐明功能寡糖的结构与功能的关系奠定了基础。

国外前沿

日本对寡糖链的研究走在世界的前列。早在上世纪70年代就掀起了研究寡糖的风潮,日本政府也为此投入了巨资鼓励研究和推广。通过几十年的运用实践和普及,目前已取得了可喜的功绩。有专家分析,也正因为这样,才使日本在短短的几十年中整个国民的平均寿命居于了世界首位。

在日本和一些发达国家的大量功能试验也证实:壳寡糖犹如“人体环保剂”,能净化体内环境,有效杀死体内病毒株,排除体内有害物质,为人体细胞创造一个健康的优质环境。通过服用由“寡糖链”组成的壳寡糖,可以修复细胞糖链网,让人体细胞的自然抗病力和活性恢复到健康自然的状态,从而使人体不易患病或使已患的疾病自然痊愈。

医学应用

在医学领域,壳寡糖在调节血糖、调节血压、降血脂、排体内毒素、排体内重金属、抗肿瘤、调节机体免疫力等方面有明显的优势。

随着科学研究的不断深入,科学家们发现:壳寡糖在改善肠胃功能、改善骨关节功能、活化细胞、清除体内多余自由基、抗衰老、调节机体内环境,改善生命质量等方面也显示出不错的效果。

科学家们预言:壳寡糖将为人类的健康事业做出巨大的贡献,21世纪,将是壳寡糖的世纪。

科学论断

继蛋白质学、基因学后,科学家们通过大量的研究得出结论:能左右人体健康,控制人体疾病的是“寡糖链”。 “寡糖链”是解释生命传达形式的载体物质,有机物与无机物的显著区别就在于“寡糖链”。

壳寡糖是由“寡糖链”组成的,是人体细胞的信息传导链,它犹如人体的神经传导网,时刻向DNA传输各类信息,DNA会根据获取的信息做出对应的表达;这种表达恰似大脑向人体器官发出对应指令一样。

人体的生、老、病、死都与其体内的细胞组成成份“寡糖链”的变化有着直接的关系。也就是说,通过改变人体细胞的“寡糖链”,可控制不同细胞的生长 、发育甚至死亡。

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