第三步需要将样本管放入密封袋中保存好并及时送检；

第四步便将需样本送进实验室进行核酸提取；

最后一步便进行荧光PCR核酸检测，将提取物进行荧光PCR扩增反应。

1.鼻咽拭子：采样人员一手轻扶被采集人员的头部，一手执拭子，拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转一周（如遇反射性咳嗽，应停留片刻），然后缓缓取出拭子，将拭子头浸入含2～3ml病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。

2.咽拭子：被采集人员先用生理盐水漱口，采样人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润（禁止将拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起过敏），被采集人员头部微仰，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧咽扁桃体，将拭子越过舌根，在被采集者两侧咽扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，将拭子头浸入含2～3ml病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。咽拭子也可与鼻咽拭子放置于同一管中。

3.鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用与负压泵相连的收集器从鼻咽部抽取粘液或从气管抽取呼吸道分泌物。将收集器头部插入鼻腔或气管，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采样液冲洗收集器1次（亦可用小儿导尿管接在50ml注射器上来替代收集器）。

4.深咳痰液：要求病人深咳后，将咳出的痰液收集于含3ml采样液的采样管中。如果痰液未收集于采样液中，可在检测前，加入2～3ml采样液，或加入痰液等体积的痰液消化液。

5.支气管灌洗液：将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管（约30cm深处），注入5ml生理盐水，接通负压，旋转收集器头部并缓慢退出，收集抽取的粘液，并用采样液冲洗收集器1次，也可用小儿导尿管接在50ml注射器上来替代收集。

6.肺泡灌洗液：局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其顶端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓加入灭菌生理盐水，每次30～50ml，总量100～250ml，不应超过300ml。

7.粪便标本：取1ml标本处理液，挑取黄豆粒大小的便标本加至管中，轻轻吹吸3-5次，室温静置10分钟，以8000 rpm离心5分钟，吸取上清液进行检测。

8.肛拭子：用消毒棉拭子轻轻插入肛门3～5cm，再轻轻旋转拔出，立即放入含有3～5ml病毒保存液的15ml外螺旋盖采样管中，弃去尾部，旋紧管盖。

9.血液标本：建议使用含有EDTA抗凝剂的真空采血管采集血液标本5ml，根据所选用核酸提取试剂的类型确定以全血或血浆进行核酸提取。如需分离血浆，将全血1500～2000rpm离心10分钟，收集上清于无菌螺口塑料管中。

10.血清标本：用真空负压采血管采集血液标本5ml，室温静置30分钟，1500～2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。

判断结果

阴性:无Ct值或Ct为40。

阳性：Ct值＜37，可报告为阳性。

灰区：Ct值在37-40之间，建议重复实验，若重做结果Ct值＜40，扩增曲线有明显起峰，该样本判断为阳性,否则为阴性。

注：如使用商品化试剂盒，则以厂家提供的说明书为准。

病例确认

实验室确认阳性病例需满足以下两个条件中的一个：

（1）同一份标本中新型冠状病毒2个靶标（ORF1ab、N）实时荧光RT-PCR检测结果均为阳性。如果出现单个靶标阳性的检测结果，则需要重新采样，重新检测。如果仍然为单靶标阳性，判定为阳性。

（2）两种标本实时荧光RT-PCR同时出现单靶标阳性，或同种类型标本两次采样检测中均出现单个靶标阳性的检测结果，可判定为阳性。

核酸检测结果阴性不能排除新型冠状病毒感染，需要排除可能产生假阴性的因素，包括：样本质量差，比如口咽等部位的呼吸道样本；样本收集的过早或过晚；没有正确的保存、运输和处理样本；技术本身存在的原因，如病毒变异、PCR抑制等。

血清抗体检测（胶体金、磁微粒化学发光、ELISA）用作新型冠状病毒核酸检测阴性病例的补充检测，在疑似病例诊断中与核酸检测协同使用，或用于人群血清学调查和既往暴露调查。实验室确认阳性病例需满足以下两个条件中的一个：

1.血清新型冠状病毒IgM和IgG抗体阳性；

2.血清新型冠状病毒IgG抗体由阴性转为阳性或恢复期较急性期有4倍及以上升高。

发病后7天内的急性期抗凝血用于IgM和IgG检测，如果检测结果阴性，建议发病后10天内再次采集进行检测。发病后3-4周恢复期血清用于IgG检测。如果采用商品化试剂盒，则以厂家说明书为准。

一、检测前：做核酸检测前2小时尽量避免进食，以免引起呕吐；采样前30分钟做到不喝水和饮料、不吸烟、不喝酒、不咀嚼口香糖等；临检要减少吞咽动作，不做清嗓子（咳痰、吐痰）动作。采集鼻咽拭子前，被检测者应告知采集人员是否有相关既往病史或相关事项。例如鼻腔手术史、鼻中隔弯曲、血液病、咽喉疾病，或服用抗凝药等相关危险因素；检测者需要正确佩戴口罩，检测前取下口罩，检测后立即戴好，可准备一个备用口罩，污染后方便随时更换。检测等待过程中保持“一米线”距离。

二、检测中：在采集口咽拭子时被检测者头后仰，张口发出“啊”音，有助于暴露咽喉，但过程中会出现刺激性干咳、恶心、呕吐等症状，被检测者可配合采集人员尽量放松、深呼吸；采集过程中可能出现鼻部酸痒感，刺激打喷嚏，可立即用纸巾（提前备好）或手肘遮挡。

三、检测后：采集后立即离开采集地点，避免在采集地点周围吐痰，呕吐。核酸检测前后都需要注意手部卫生，可使用免洗手消毒液或免洗酒精擦拭双手。另外为了能提高效率，可提前准备：由于医护人员防护严密，可能听不清讲话，同时也是为了提高效率，请务必一定带好身份证或户口本，佩戴口罩（最好带两个，其中一个备用），带包纸巾（采集可能引发不适流泪），可以提前把姓名、身份证号、住址、联系电话，提前写张纸条（写的时候注意请保持字体工整，防止工作人员无法识别）交给相关人员！

要做好工作预案和组织管理。要求各地提前做好工作预案，明确组织架构，理顺从“采样-转运-检测-结果回报”全链条的工作流程。同时为做到高效转运，需要统筹检测机构布局和检测能力等，利用信息化系统很快把检测结果回报给公众。“做好工作预案非常重要，一旦疫情需要开展大规模核酸检测，各部门能够迅速地启动预案，协调配合做好‘采、送、检、报’全流程工作来提高效率。

原则上以小区为单位设置采样点。采样点的布局要综合人口数量、地理交通以及核酸检测机构的布局，可以参考每2000-3000人来设置一个采样点，每600-800人设置一个采样台。

要加强采样现场的组织管理。要设立清晰的指引标识，规划好进出路线，保证所有的采样人员是单向流动，而且要明确采样流程和注意事项。为了避免人员聚集，要求提前通知大家，做好分时段的预约，避免老百姓排队时间过长或者是人员过于集中，缩短排队时间，减少大家在短时间内聚集。同时，要求现场配备好工作人员、志愿者来加强采样秩序的维护，并指导公众做好个人防护以及信息采集。对于特殊人群，比如老年人、孕妇、孩子，要求设立“绿色通道”，让他们顺畅完成采样，同时也增强人性化的关怀。

社会公众也要给予积极配合。参加核酸检测的公众要戴口罩，不聚集，保持安全距离，自觉地服从现场工作人员的指引，而且采样过程中不要触碰采样台及采样台上任何物品，采样结束后尽快戴上口罩，迅速离开现场。做好大规模核酸检测采样工作是很不容易的，需要精细的组织管理工作，同时也需要公众非常好的配合。

2021年1月份，各省集中下调公立医院核酸检测的政府指导价，单人单检从每人份120元以上降至80元左右。

截至9月16日，已有广东、湖北、上海、天津、河北等共计30个省份下调公立医院新冠病毒核酸检测价格，绝大多数省份将单人单检价格降至每人份60元或更低水平，10人混检价格降至每人份15元或更低水平。

2021年12月10日起，云南核酸检测价格再次下调，总费用（含检测费用和单独收费的核酸检测试剂）不超过40元/次。

2021年12月11日起，北京市公立医疗机构新冠病毒核酸检测单样本价格由58元降低至35元/次，5样本、10样本混合检测价格同步由每样本18元、13元统一降低至8元。

2021年12月3日，河南省医疗保障局等六部门联合印发《关于进一步降低新型冠状病毒核酸检测项目价格的通知》，明确自2021年12月10日起， 新型冠状病毒核酸检测（标本单采）项目价格由50元/人次下调至30元/人次（不含核酸检测扩增试剂）， 新型冠状病毒核酸检测（标本混采）项目价格由15元/人次下调至10元/人次。

2021年12月30日，广东省发展改革委、广东省财政厅发布《关于进一步降低疾控机构新冠病毒核酸检测收费标准的通知》（以下简称“通知”），核酸单样检测最高40元。

2022年3月，根据疫情防控需要，国务院联防联控机制综合组研究决定，推进“抗原筛查、核酸诊断”的监测模式，在核酸检测基础上增加抗原检测作为补充。社区居民有自我检测需求的，可通过零售药店、网络销售平台等渠道，自行购买抗原检测试剂进行自测。

2022年5月1日，河南再次降低新冠病毒核酸检测价格，自5月1日起混采每人4元。

自2022年5月20日起，深圳市新冠病毒核酸单人单检价格降至每人份不超过18元（其中检测服务费降至每人份不超过12.5元）；核酸多人混检价格降至每人份不超过5元，政府组织的大规模筛查、常态化检测的多人混检价格降至每人份不超过3元；抗原检测价格降至每人份不超过6元（其中检测服务费降至每人份不超过2元）。

2022年5月23日，国家医保局办公室、国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制医疗救治组印发《关于进一步降低新冠病毒核酸检测和抗原检测价格的通知》，要求各地在6月10日前将新冠病毒核酸检测单人单检降至不高于每人份16元，多人混检降至不高于每人份5元。

自2022年6月10日起，河南省新冠病毒核酸检测标本单采项目价格由24元/人次下调至16元/人次（含相关试剂及耗材），新冠病毒抗原检测项目价格由15元/人次下调至6元/人次（含相关试剂及耗材）。

2021年10月，国家卫健委发布《关于进一步强化当前新冠病毒核酸检测服务的通知》。通知要求，核酸检测机构要向社会提供24小时核酸检测服务。要加强核酸采样、送检、报告各环节衔接，在保证检测质量的前提下，发挥核酸检测仪器设备最大效能，在规定的反馈时间基础上，进一步缩短核酸检测结果报告时间。特别是对“愿检尽检”人群的核酸检测，要力争在6小时之内报告结果，并通过信息化手段及时向群众推送，鼓励根据检测量，配备新冠病毒核酸快检试剂及配套设备，减少等待时间。

2022年5月13日，国家卫健委医政医管局监察专员郭燕红在国务院联防联控机制新闻发布会上表示，经过两年多来积极建设，我国核酸检测能力取得长足进步。根据全国新冠病毒核酸检测信息平台数据，全国有1.3万家医疗卫生机构可以开展核酸检测，全国拥有15.3万的专业技术人员从事核酸检测技术工作，核酸检测能力已经能够达到单管每日5700万管，总体来看，整个核酸检测的能力，得到了显著的提升。

2022年5月13日，国家卫健委医政医管局监察专员郭燕红在国务院联防联控机制新闻发布会上表示，在大城市建立步行15分钟核酸“采样圈”，有利于老百姓就近就便进行核酸检测，有利于感染的早发现，进一步提高疫情监测预警的灵敏性。

2022年7月29日，国务院联防联控机制印发通知，要求进一步推动新冠病毒核酸检测结果全国互认。通知要求：高度重视核酸检测结果全国互认的重要性；不同渠道展示的核酸检测结果具有同等效力。

2022年8月，山东健康码实现了跨省核酸检测结果展示和互认。

2022年12月，常态化便民核酸采样点采取自愿自费、单人单管，不再有混采的选项。

2021年8月12日，新华网消息，德国政府将从10月起停止向全体民众提供免费新冠病毒检测，以期进一步推动新冠疫苗接种。

2022年4月19日，国际标准化组织（ISO）发布《体外诊断检验系统—核酸扩增法检测严重急性呼吸系统综合征冠状病毒 2（SARS-CoV-2）的要求及建议》（ISO/TS 5798:2022）国际标准。