更新时间：2022-08-26 11:08
沉淀杂质是除杂质的一种常用方法。在混合物中加入某种试剂，使其中一种以沉淀的形式分离出去的方法。使用该种方法一定要注意不能引入新的杂质。
二氧化碳沉淀法去除苯扎贝特中主要杂质
苯扎贝特（bezafibrate，BZ） ，化学名为2-[4-[2-（4-氯苯甲酰氨基） 乙基]苯氧基]-2-甲基丙酸，主要用于治疗高甘油三酯血症、高胆固醇血症、混合型高脂血症，是治疗各型脂质代谢障碍的一线药物。BZ的合成及其质量控制是应用和研究得以顺利进行的重要保障。
BZ的合成大多以对氯苯甲酰氯和对羟基苯乙胺为原料，经酰化反应制得中间体N-对羟基苯乙基-4-氯苯甲酰胺（CLN） ，再在氢氧化钠的催化下，与丙酮和氯仿缩合制得。目前该合成路线已实现工业化多年，但对BZ质量稳定性的控制还存在问题，主要原因在于第二步缩合反应机理为卡宾反应，因反应自发而放出的大量热导致反应温度迅速上升，直接影响BZ的质量。据文献报道，BZ中的主要杂质为未完全转化的原料CLN，中国药典也对该药物的杂质提出了限量检查。
目前已有的研究主要集中在合成工艺的优化和改进，对于杂质含量较高的粗品的纯化除了采用传统的重结晶方法外，未见其它的后处理工艺。
1、仪器和试剂
BZ对照品（中国药品生物制品检定所，批号100732-200501） ；CLN对照品（ 江苏天士力帝益药业有限公司，批号20130509，99.5%） ； 甲醇为色谱纯，磷酸二氢钾为色谱级，流动相中水为双蒸水，其它试剂均为分析纯。1100 LC型高效液相色谱仪（美国Agilent公司） ，G1315B型紫外检测器（ 美国Agilent公司）。
2、BZ传统后处理工艺
将CLN10g（35mmol） 和丙酮200mL加至500mL三颈瓶中混合溶解，再加入氢氧化钠23g，25～28℃搅拌0.5h，升温至30～35℃，滴加氯仿12mL，并控制温度为35 ～38℃，滴毕，在此温度反应1h后再升温回流1h。停止反应，回收丙酮。稍冷后加入水300mL溶解剩余物，并于5℃搅拌下滴加15%盐酸调至pH值3～4，析出固体，继续搅拌1h后抽滤，滤饼水洗、干燥，得米白色BZ粗品（12.7g，收率96.8%）。该粗品经95%乙醇两次重结晶，得白色BZ产品（8.2g，两次重结晶收率64.5%）。
将上节所得反应物回收丙酮、加水溶解后，向其水溶液中通入CO2至饱和（pH值5~6） ，此时析出CLN白色固体，过滤，滤液按上节中15%盐酸酸化处理，得白色BZ粗品（10.7g，收率81.6%）。该粗品经95%乙醇一次重结晶，得白色BZ产品（9.6g，重结晶收率89.8%）。
对合成所得BZ粗品进行HPLC检测，和BZ的对照品图谱比较可知，粗品中的主要杂质是CLN，是由于反应过程中原料转化不完全造成的。由于CLN和BZ的结构分别为酚和羧酸，均具有一定的酸性，在合成反应结束后的强碱性溶液中，二者均以钠盐的形式共存并溶于水中，继而随盐酸酸化而同时析出，因此传统的后处理工艺很难将二者分离，只能通过重结晶在产品精制过程中将CLN去除。CO2沉淀工艺是根据酚和羧酸酸性的差异，在溶有BZ和CLN钠盐的水溶液中通入CO2，将CLN钠盐转化为酚析出，而产物BZ仍以羧酸钠的形式溶于水溶液中，通过简单的过滤即可将二者分离。
在反应液中通入CO2后，将所得沉淀分离纯化，得到少量白色粉末，经熔点测定为171～173℃，与文献报道的CLN熔点一致，且经核磁共振氢谱和质谱解析为CLN； 而将滤除沉淀后的滤液酸化至pH值3～4，析出的大量白色粉末经重结晶后，测定其熔点为181～183℃，与BZ对照品一致，且结构经核磁共振氢谱解析和质谱解析为BZ，说明反应液中上述两种物质的共存。
采用传统的重结晶工艺，粗品需经两次重结晶方得合格产品，合格品总收率为62.5%；而经CO2沉淀处理后，粗品仅需一次重结晶即可达合格要求，BZ含量（99.6%） 也略高于传统工艺（99.2%），总收率提高到70.9% 。另外，由于重结晶次数减少，溶剂乙醇消耗量也由原来的9kg/kg粗品减少为4kg/kg粗品。可见，CO2沉淀处理工艺减少了重结晶次数，提高了合格品收率，降低了有机溶剂消耗量。