TMB作为过氧化氢酶底物用在ELISA 反应中，该底物能产生可溶性淡蓝色的末端产物，能在370 或 620-650 nm用分光光度计读取。TMB反应可以用2 M H2SO4 (产生黄色)终止, 并能在450 nm读取。因此TMB是测定血液、检测血红素（hemoglobin）和过氧化物酶的灵敏和特定试剂。

熔点：168-171 °C

TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物，应用于临床化验、法医检验、刑事侦破及环境监测等领域。尤其是在临床生化检验方面，TMB作为过氧化酶的新底物，在酶免疫分析法（EIA）和酶联免疫吸附检验法（ELISA）中获得了广泛的应用。