电转化

更新时间:2023-06-14 21:03

电转化(electrotransformation),也有人称作高压电穿孔法(high-voltage electroproration,简称电穿孔法electroproration),可用于将DNA 导入真核细胞(如动物细胞植物细胞) 和原核细胞(转化大肠杆菌和其他细菌等)。

电转化技术的主要优点在于:对于磷酸钙DNA共沉淀法以及其他技术难以转化的细胞,电穿孔法仍可适用。电转化的效率高,既可用于克隆化基因的瞬间表达,也可用于建立整合有外源基因的细胞系。但是要决定特定细胞系的最佳转化条件必须进行大量工作。已有商品化的电穿孔装置如电穿孔仪(electroporationapparatus)(图6.1),厂商会提供装置的有关操作规程。如GenepulserElectroporationSystem(Bio-Rad),将两个或三个简单脉冲结合成一次脉冲I,有可能利用一次高频元件起动脉冲,用适当的细菌悬液、抗性参数以及适当的电脉冲持续时间,可得到较高的转化率(TyurinM.V.,1992)。

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