由美国女传教士那夏礼主持院务，只招女生。初办时有女生六人，院址设在金利埠（现六二三路）。后遭火灾，乃迁校于仁济街（现中山医学院附属第二医院门诊部）。1909年，将书院改为真光中学堂，增设师范科。

1912年，改校名为私立真光女子中学。1914年，由刘心慈任校长（该校早期毕业生）。在白鹤洞建筑新校舍。1917年，新校舍建成，中学部迁入新校，小学部及附设的妇人传道班仍在仁济街旧址开课，附设的师范班则并入私立协和女子师范学校。

1925年，由罗道真代理校长。1928年，遵照教育部关于外国人、外国教会不得在华办设中学的规定，于是将真光中学交回华人教会仁济堂办理，改组校董会，由关恩佐任董事长，罗有节任校长（罗有节、罗道真为刘心慈的长、次女）。另将仁济路的小学扩大，设为中学。不久，遵照教育部关于在同一市区内，不得有两校同名同级的规定，于是将白鹤洞新校命名为私立真光女子中学，设初中、高中两部，麦廷锦为校长。后由何荫棠、李耀宇继任。另将仁济路旧校改为私立真中女子初级中学，由罗有节任校长。 教会学校对学生的管理颇严，特别是女校，规章制度更多。学生受西方文化和宗教的影响较深，但对学习质量，则有一定的严格要求。