1601年（一说1602年）出生，当时父亲真田幸村因关原之战被流放到纪伊国九度山(和歌山县九度山町)，后来他被以祖父真田昌幸之名倒转过来、命名为幸昌。12岁时随父亲信繁入大坂城，并在大阪夏之阵出阵，讨取许多武将，建有大功，父亲命他要守到大阪城被攻落。这时大助原本要与父亲一同行动，但父命不能违，于是回到大阪城里。1615年5月7日其父真田幸村战死于安居神社，头颅被敌将西尾宗庆讨取，丰臣秀赖和淀姬母子在一个仓库被德川军发现，大野治长曾经希望用自己一家的性命换取丰臣秀赖母子，被拒绝，秀赖母子被迫自杀，真田幸昌亦为丰臣秀赖殉死，大阪方包括大野治长在内的多名家臣被杀死，连秀赖的幼子也未能幸免。公元1615年5月8日，大阪城陷落，丰臣氏灭亡。