组织块培养法

更新时间:2021-09-14 15:45

细胞培养的重要方法之一。

翻转干涸

1、将组织剪成1mm3左右的组织块

2、用PBS缓冲液清洗组织块3次

3、将组织块按照一定间距转入培养瓶内

4、轻轻将培养瓶翻转过来,将适量培养液加到非细胞生长面上,注意翻瓶时勿令组织小块流动,塞好瓶塞置36.5℃温箱培养2小时左右(勿超过4小时),使小块微干涸

5、从微箱中取出培养瓶,开塞,46度斜持培养瓶,箱瓶底脚部轻轻注入培养液少许,然后缓缓再把培养瓶翻转过来,让培养液慢慢覆盖附于瓶底上的组织小块置温箱中静止培养

6、待细胞从组织块游出量增后,再补加培养液

薄层培养

1、将组织剪成1mm3左右的组织块

2、用PBS缓冲液清洗组织块3次

3、将组织块按照一定间距转入培养瓶内4、静置30分钟(使组织块更好的贴壁)

5、每瓶加入2.0mL新鲜培养液(缓慢,防止组织块浮起),塞好瓶塞置37oC恒温培养箱内培养

6、根据培养液的颜色变化,更换培养液(每天进行细胞形态观测,细胞计数,测上清液PH值)

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