两个或多个分子相互作用后以共价键结合成一个大分子，同时失去水的反应叫脱水缩合反应。它是缩合反应的一种形式。

生化中很多形成生物大分子的反应都是靠形成水缩合形成的，以最为常见的蛋白质的形成为例：一个氨基酸分子的羧基（-COOH）和另一个氨基酸分子的氨基（-NH2）相连接，同时失去一分子的水，这种结合方式叫做脱水缩合。2个氨基酸分子通过脱水缩合形成一个肽键，3个氨基酸分子通过脱水缩合形成二个肽键，以此类推，10个氨基酸则会形成9个肽键。

公式：形成肽键数（脱去的水分子数）=氨基酸分子数-肽链条数。

水解时需要的水分子等于脱水缩合时失去的水分子。