(1) 玻片法　① 加1滴抗-D试剂于玻片上。　② 再加1滴35-45%的被检红细胞悬液。该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞。　③ 轻轻摇晃玻片，肉眼观察结果。如果凝集表示被检红细胞上存在D抗原Rh(D)阳性，无凝集为Rh(D) 阴性。　④ 如呈阴性，需用试管法重做一遍试验。　(2) 试管法　① 加1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中。　② 再加一滴约5%的被检红细胞悬液于试管中。混匀。　③ 离心，立即以1000r/min 离心1 min。　④ 观察结果用肉眼观察，完全凝集的管，液体清亮，底部有红细胞的凝块，管底细胞呈花边状，轻弹试管凝块不散;完全不凝的液面清亮，血细胞均匀地沉到管底，边缘整齐，用手指轻弹试管，红细胞像一缕烟似地立即上升，随即成为均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载片上镜检后决定。　⑤ 如果凝集表示被检红细胞上存在D抗原Rh(D)阳性，无凝集为Rh(D) 阴性。