顾静徽，1900年7月1日生于江苏嘉定县（今属上海市）。父母早亡，在继母支持下，20岁之前曾入嘉定小学、江苏省立师范学校（苏州），刻苦读书。1920年入上海大同大学，成为胡刚复的学生。1923年尚在大同念书的顾静徽考取留美公费生，入美国康奈尔大学文理学院，1926年获学士学位。1928年，获耶鲁大学硕士学位，同年入密歇根大学研究院，师从理论物理学家丹尼森（D.M. Dennison，1900-1976）研究光谱学，1929年成为美国物理学会会员，1931年获物理学博士学位，成为我国近代史上第一个获此学位的女性工作者。

顾静徽于1931年回国，先任南开大学物理系教授兼物理系主任（1931-1933），成为继饶毓泰（1891-1968）之后第二任南开大学物理系主任；后任上海大同大学物理系教授、中央研究院物理研究所兼任研究员（1933-1937）。1938-1939年在德国柏林威廉皇帝物理研究所（Kaiser Wilhelm-Institutfür Physik，今普朗克物理研究所）任客座自然科学家。1940年，回国任唐山交通大学物理学教授（其时，该校在贵州平越县，即今福泉县）。1928年，实业家马君武（1882-1939）于梧州创办广西大学，1936年，该校迁桂林并成为省立大学。从抗战时起，国内北方与东方各大专院校西迁，许多流离的名家教授云集西南，也到广西大学任教，1939年，该校遂更改为国立大学。顾静徽被该校聘为教授（1941-1945）。抗战胜利后，西南的各院校复迁原地。顾静徽于1946年回大同大学任教，1947年任职于上海国立编译馆。1949至1952年9月又任教于大同大学。此后，她一直任北京钢铁学院（今北京科技大学）教授、物理教研室主任（1952-1983），并任中国物理学会北京市分会第一届副理事长。她还是中国物理学会的筹办者之一。1932年，中国物理学会成立暨第一次年会筹备会议上，她是该筹备委员会委员兼论文组审查人，1956年加入中国共产党。1983年10月30日卒于北京。