高笑林自幼随父学说相声。11岁拜马三立为师。1949年参加南京市文管处组建的渡江文艺宣传队慰问演出。1953年赴朝鲜为志愿军战士演出6个月，荣立三等功。1958年支援安徽，由南京市曲艺团到合肥市曲艺团工作，是安徽专业相声的创始人。在安徽工作几十年，悉心育人，培养了许多优秀的相声演员和大批相声观众。从1953年到1977年曾为毛泽东、彭德怀、贺龙、万里等演出，多次受到嘉奖。2000年中国曲艺家协会授予“新中国曲艺50年特别贡献曲艺家”称号。