鸡卵类粘蛋白

更新时间:2022-01-13 02:46

鸡卵类粘蛋白(chicken ovomucoid 简称CHOM)是由鸡卵清中制成的一种糖蛋白,是一种专一性很强的胰蛋白酶的抑制剂,对猪和牛的胰蛋白酶有很强的抑制作用(而对胰凝乳蛋白酶无抑制作用)。

名词释义

鸡卵类粘蛋白(ovomucoid,CHOM)在pH7.8~8的碱性条件下,具有很强的结合胰蛋白酶的活性,而且这种结合是可逆的。所以将CHOM连接到层析介质载体上,用含有胰蛋白酶和杂蛋白的混合液过柱,就可以将胰蛋白酶吸附在柱上,从而与其它成分分离开来,然后用酸性溶液即可将纯的胰蛋白酶洗脱下来。

特性

1.糖蛋白

2.在中性及偏酸性溶液中对热及高浓度的脲,有机溶剂都有较高耐受性;碱性溶液不稳定

3.在50%丙酮或10%三氯乙酸溶液中仍有较好的溶解度

测定原理

鸡卵类粘蛋白具有强烈的抑制胰蛋白酶的作用;胰蛋白酶能水解酯键,酰胺键和肽键,利用这一性质用人工合成的底物或天然的蛋白质可以测定胰蛋白酶的活力,由此可计算卵类粘蛋白的活力.

实验流程

卵类粘蛋白的抽提(活力测定)→分子筛层析(凝胶预处理→装柱→平衡→上样→洗脱→收集蛋白峰→活力测定)→离子交换层析(活力测定)→透析→丙酮沉淀→离心(活力测定)

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