9. 2005、6- 湖南农业大学，教授；

猪瘟基因工程抗原的研制及应用: 军队科技进步三等奖。

农业部全国动物防疫专家委员会委员、中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会常务理事、国家兽用药品工程技术研究中心学术委员会生物制品专业委员会委员。

余兴龙教授主要从事畜禽疫病的诊断、分子病毒学与基因工程等方面的研究。先后主持或参与国家、省部级科研课题近30项，主持国家自然科学基金项目3项、“863” 课题、省教育厅重点课题和省科技厅重点课题各1项；参加国家自然科学基金重大项目和973课题各1项、“863”项目和国家攻关课题各2项。发表科研论文100余篇，其中Sci论文30余篇，Ei收录论文2篇，获发明专利5个。先后获得省科技进步一等奖1项，省科技进步二等奖2项，军队科技进步二等奖1项、 三等奖3项。

1．1992－1995，我国南海战略要地自然疫源病调查， 全军医药卫生重点课题。主要工作有：从蚊子、蠓、蜱、鼠形动物和蝙蝠中分离虫媒病毒及虫媒病毒的血清学调查(人和鼠), 立克次体的分离及血清学调查(人和鼠), 以及参与疫病病原传染媒介及宿主动物的生态学调查(地理分布，季节性及昼夜变化规律)；

2．1996－2000，猪瘟基因疫苗的研究，国家“九、五”科技攻关项目，项目副主持人和执行人。以RT-PCR的方法克隆得到猪瘟病毒的主要保护性抗原E2基因，然后构建了E2基因4种不同的真核表达质粒，通过体外细胞表达试验，小鼠免疫试验和家兔免疫保护试验，筛选确立了1种能高效表达E2基因并能诱导动物机体良好免疫保护反应的基因疫苗质粒。猪体免疫保护试验表明该基因疫苗具有诱导猪产生坚强的抵抗猪瘟病毒攻击的能力。课题还对影响基因疫苗的因素进行了探讨，发现抗原基因的不能功能基序(motif)对基因疫苗的表达水平和所诱导的免疫应答水平有着重要影响。本研究还发明了一种大规模的质粒纯化方法。发表文章10余篇，获得军队科技进步奖1项和申报发明专利2项；

3．1998－2002，我国畜禽四种主要疫病病原生态学和分子流行病学研究，国家自然科学基金重大项目（课题编号：39893290），主参加者。利用现代分子流行病学的方法在全国范围内对我国不同地区的猪瘟病毒流行毒株的主要保护抗原基因进行了大规模的基因测序，首次从基因水平揭示了我国猪瘟病毒在抗原基因上存在着明显的遗传变异现象；弄清了我国猪瘟病毒复杂的遗传多态性背景。（论文已发表国外病毒学专业杂志）

4．1999－，病毒免疫基因及其编码蛋白结构与功能研究，国家重点基础研究发展规划（973课题，编号：G1999011903），主参加者。顺利进行。首次实现了猪瘟病毒免疫原蛋白在T4噬菌体的展示。已申报1项国家发明专利。

5．2000－，自发荧光猪瘟兔化弱毒重组病毒的构建，国家自然科学基金课题（39970557）, 主持人。先以RT-PCR分5段克隆了猪瘟病毒基因组12.3kb的全部cDNA序列，然后将这5个片段依次连接而得到了猪瘟病毒基因组的全长cDNA序列。现已构建得到含报告基因GFP的全长cDNA基因组序列并通过体外转录获得了含GFP的全长基因组序列（RNA），正在进行细胞转染及重组病毒的克隆与筛选。发表文章1篇，待发表2篇

6．2001－，我国猪瘟病毒的分子流行病学监测，农业部“十五”畜禽疫病防制计划项目，参加者，完成规定的东北、华南和西南三大区域2001年度猪瘟病毒的分子流行病学监测任务。为国家畜禽疫病控制提供了宝贵数据

7．2001－ 猪病毒性疾病分子诊断试剂盒的研究， 国家“十五”863课题（编号：2001AA249011），分题主持人和主要执行者。在大肠杆菌高效表达了猪瘟病毒的主要保护性抗原E2基因, 获得免疫原性良好的E2重组蛋白,并对此蛋白进行了纯化,以此为基础, 研制了猪瘟免疫监测试剂盒。

8．2001、06-2004、06，畜禽重大疫病诊断技术研究与试剂盒产业化(课题) 猪瘟诊断技术与试剂盒产业化(子课题，2002BA514A-18-2)，国家科技攻关计划

9．2004、01－2006、12：应用RNAi研究猪瘟病毒基因组的功能。国家自然科学基金面上项目（编号：30371071）

10．2004、09－2006、12：口蹄疫的快速诊断技术, 湖南省教育厅重点课题（编号：04A025）。主持

11． 2003年：“非典”动物溯源的研究(农业部专家调查组)，参加

12． 2006-2008:利用猪圆环病毒-2研制新型基因疫苗载体。国家自然科学基金面上项目(项目批准号：30571390)。主持

13． 2006－2009：禽流感防控关键技术研究。省科技厅重点课题（项目编号：2006NK2003）

14． 2007－2010：生猪产业化关键技术研究与示范，重大疫病的防制与净化技术研究与示范专题湖南省重大专项(2007FJ1003)

2006-2010:猪瘟、猪伪狂犬病综合防控技术集成与示范。国家科技支撑计划（项目编号：2006BAD06A00）

2010-2012,免疫佐剂激发PCV-2感染的分子机制, 国家自然科学基金面上项目(项目批准号：30972167)。主持

15． 长沙市科技计划重大专项：标准化种植和养殖关键技术研究与示范。　2009、9－2012、9　（计划编号 K0902007－21）

16. 2010－2012 猪瘟病毒基因组编码蛋白的免疫原性分析及其免疫应答规律研究，高等学校博士学科点专项基金课题，2010 4 3 2011 04

17. 2011－2013，红斑丹毒丝菌的反向疫苗学研究，2011FJ2017，湖南省科技厅重点课题

18. 2011、10-2003、10 市校产学研合作产业化培育项目，猪圆环病毒抗体检测ELISA试剂盒的产业化开发（项目编号：(Y)00046-173）11CY026

英文期刊论文

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70． 李晶余兴龙李润成罗维向卫军李薇王亚葛猛，猪巨细胞病毒的PCR检测及其gB基因特征分析,湖南农业大学学报35:521-525,209，2009

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猪瘟基因疫苗的研究

1996－2000，猪瘟基因疫苗的研究，国家“九、五”科技攻关项目，项目副主持人和执行人。以RT-PCR的方法克隆得到猪瘟病毒的主要保护性抗原E2基因，然后构建了E2基因4种不同的真核表达质粒，通过体外细胞表达试验，小鼠免疫试验和家兔免疫保护试验，筛选确立了1种能高效表达E2基因并能诱导动物机体良好免疫保护反应的基因疫苗质粒。猪体免疫保护试验表明该基因疫苗具有诱导猪产生坚强的抵抗猪瘟病毒攻击的能力。课题还对影响基因疫苗的因素进行了探讨，发现抗原基因的不能功能基序(motif)对基因疫苗的表达水平和所诱导的免疫应答水平有着重要影响。本研究还发明了一种大规模的质粒纯化方法和一种高效体内核酸转染试剂。

四种主要疫病病原生态学和分子流行病学研究

1998－2002，我国畜禽四种主要疫病病原生态学和分子流行病学研究，国家自然科学基金重大项目（课题编号：39893290），主参加者。利用现代分子流行病学的方法在全国范围内对我国不同地区的猪瘟病毒流行毒株的主要保护抗原基因进行了大规模的基因测序，首次从基因水平揭示了我国猪瘟病毒在抗原基因上存在着明显的遗传变异现象；弄清了我国猪瘟病毒复杂的遗传多态性背景。

猪瘟基因工程抗原的研制及应用

猪瘟病毒(CSFV)E2囊膜糖蛋白基因是其主要保护性性抗原基因，E2基因的表达产物可作为猪瘟血清学检测的抗原。由于E2基因的结构特点，它不适合在大肠杆菌（E.coli）中进行表达，本研究先对E2基因以定点突变的方法进行改造，克服了E2基因不能在E.coli中高效表达的难题。并将改造后的E2基因克隆入原核表达质粒，获得了可在E.coli中高效表达E2基因的重组质粒，在国内首次研制出了CSFV的重组抗原，解决了CSFV诊断抗原生产困难、成本高、质量也难于控制的弊病。以此在E.coli高效表达的猪瘟病毒E2基因重组蛋白为抗原，以椒根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗猪IgG为二抗，建立了检测猪瘟病毒抗体的间接ELISA方法。该方法具有特异高、快速、敏感以及抗原成本低等特点。这是E2基因主要抗原编码区首次在E.coli中得以高效表达，为CSFV的血清学诊断和免疫监测提供大量优质的抗原奠定了基础。我国是世界上养猪最多的国家，养猪业已成为我国畜牧业的一大支柱产业，在国民经济中占有重要的地位。猪瘟是我国猪群中最常见的传染病，免疫接种是预防猪瘟的主要手段。免疫接种是否有效，需要免疫监测的检验。我国很少进行猪瘟的免疫监测，对免疫接种后所诱导的免疫保护效果了解不够。以致在实际工作中存在着很大的盲目性。我国全国各地存在着多种猪瘟的免疫程序，由于没有免疫监测的指导,这些免疫程序的制定多数是经验性的，缺乏科学依据，因而实际的预防效果并不理想。这也是我国猪瘟长期得不到控制的重要因素之一。因此，本方法的研制成功无疑将推动我国养猪业中进行猪瘟的免疫监测工作，使之为猪瘟预防接种的重要一环，将为我国彻底控制以致消灭猪瘟作出贡献。经过近多年在实践中的应用表明,在本成果指导下的猪瘟免疫预防工作明显优于不进行免疫监测的免疫预防,具有很大的经济效益。本成果在实际工作中的应用已完全成熟，具备了向全国推广应用的条件。