瞬时表达

更新时间:2023-06-27 09:55

瞬时表达,即瞬时转染后的初期,质粒DNA片段是游离在细胞中的,能够进行表达,称为瞬时转染表达。随后,游离在细胞中的质粒或DNA片段有两种归化,一种是被降解,还有一种是插入染色体中而能够持续地稳定地表达。

名词解释

在载体选用方面,瞬时表达可以不需要筛选标签,如常用的NEOG418等,但使用稳定表达的载体亦可以用来进行瞬时表达。

外源基因导入植物细胞中以后,其表达方式有瞬时表达(transient expression)和稳定表达(stable expression)两种。在瞬时表达状态的基因转移中,引入细胞的外源DNA宿主细胞染色体DNA并不发生整合。这些DNA一般随载体进入细胞后12小时内就可以表达,并持续约80小时左右。在稳定表达状态的基因转移中,导入宿主细胞的DNA整合到细胞染色体DNA上,以永久形式存在,并可传给后代,形成稳定的转化细胞基因的导入方法可分为间接转基因方法和直接转基因方法。

植物瞬时表达系统在启动子分析基因功能分析和生产重组蛋白方面用途广泛。并且具有如下优点:①简单快速。转化基因可在转化的一周内进行分析,避免了组织培养等繁杂过程;②表达水平高。当单链的T-DNA进入植物细胞后,许多未整合到植物基因组中的游离外源基因同样可以表达。③安全有效。不受植物生长发育过程的影响,不产生可遗传的后代,结果可靠直观,不存在基因漂移的风险。常用基因枪转化和农杆菌真空渗透法

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