瞬时转染

更新时间:2023-06-15 16:25

瞬时转染(transient transfection)是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞,并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。

特点

瞬时表达法具有很多优点:

瞬时转染(transient transfection)是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞,并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。

第一,操作简易和周期短。传统的稳定转化系统,从转化到获得转基因植株至少需要几个月甚至更长的时间,且转化效率比较低,瞬时表达系统仅需要2~4 周,避免了繁琐的植物组织培养过程(Kapila et al., 1997);

第二,表达效率高。当单链的T-DNA 进入植物细胞后,不但转化到植物基因组中的基因可以表达,许多未整合到植物基因组中的游离外源基因同样可以表达,拷贝数更高。其表达不受基因位置和基因沉默的影响,因而表达效率更高,可达稳定转化表达量的数倍(Janssenand Gardner, 1990; Kapila et al., 1997; Yang et al.,2000; Wroblewski et al., 2005);

第三,安全高效。稳定表达转基因植物存在食物链污染花粉传播引起的基因漂移等转基因安全问题(Twyan et al., 2003),瞬时表达中的基因转移及其表达是一个独立的过程,不产生可遗传的后代,其生物安全性要高的多,且试验结果更为直观可靠;

第四,不需要筛选基因。稳定的转基因转化通常需要抗生素或其他筛选基因进行初步筛选,其转基因植株也相对存在着转基因安全问题,瞬时表达无需筛选基因,减少了转基因中抗生素等带来的不安全因素,同时载体可以更小,更容易转化较大的目的片段和多个基因;

第五,能在完整植株上进行。在分析外源基因表达的互作与生物或非生物胁迫时,能够更真实的反应植物体内的基因表达模式。

免责声明
隐私政策
用户协议
目录 22
0{{catalogNumber[index]}}. {{item.title}}
{{item.title}}